10.3969/j.issn.2095-2783.2011.12.007
裂殖酵母Hsp90多克隆抗体的制备与鉴定
为制备兔抗裂殖酵母Hspg0多克隆抗体，在通过PCR获得了裂殖酵Hsp90（Swo1）基因后，构建了pMALc2x-Swo1表达载体，可用于表达编码正确氨基酸序列的目的基因。转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达，Amylose Resin柱纯化。目的蛋白表达量占菌体总蛋白的30％以上。纯化后，蛋白纯度达95％以上。纯化后的MBP-Swol融合蛋白抗原加福氏完全佐剂背部皮内注射首次免疫新西兰大白兔，第28天用MBP-Swol融合抗原加福氏不完全佐剂同样剂量加强免疫，第35天时再次免疫。第49天心脏采血。收集血清后，用免疫印迹（westem blor）检测Swol多克隆抗体的特异性。免疫印迹检测结果显示该抗体能够特异性识别内源性的裂殖酵母Hsp90／Swo1蛋白，但并不识别人类细胞中的Hsp90α／β。
裂殖酵母、Hsp90/Swo1、多克隆抗体
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Q291
高等学校博士学科点专项科研基金资助项目20100121110003;国家自然科学基金资助项目30871376;教育部科学技术研究重点项目108076
2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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