微小牛蜱磷酸丙糖异构酶基因片段的克隆与原核表达
为克隆和表达微小牛蜱磷酸丙糖异构酶(triosephosphate isomerase,Tim)编码基因,提取微小牛蜱成虫总RNA,采用RT-PCR方法扩增目的基因,将其连入pMD-18T载体,经酶切和测序鉴定后,将正确的目的基因与pET-28a表达载体连接,并转入大肠埃希菌(E.coli) Rosetta (DE3)中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定分析.结果发现,克隆所得的微小牛蜱成虫tim基因片段长度为750bp(登录号为JX112888),其中开放阅读框为750 bp,编码249个氨基酸,与微小牛蜱胚胎中克隆出的tim基因序列的同源性为99％.SDS-PAGE结果显示,重组蛋白Tim相对分子质量(Mr)约为27000.
微小牛蜱、磷酸丙糖异构酶、克隆、表达
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R384.41(医学寄生虫学)
国家自然科学基金39660073;广东省科技重点专项2003A3080502;深圳大学校创新科研团队基金200904
2012-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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