日本血吸虫感染小鼠肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答
目的 观察C57BL/6小鼠感染日本血吸虫后肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答.方法 20只C57BL/6小鼠随机分为感染组和对照组,每组10只,感染组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴,每鼠(40±5)条.感染后5～6周分离小鼠肠系膜淋巴结的淋巴细胞,分别用抗小鼠CD3单克隆抗体(anti-CD3,1μg/ml)和抗小鼠CD28单克隆抗体(anti-CD28,1μg/ml)刺激,培养4h后收集细胞,RT-PCR检测小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞中白细胞介素17 (IL-17)和维甲酸相关孤独受体(ROR-γt) mRNA的转录水平；培养72 h后,ELISA检测细胞培养上清液IL-17和γ干扰素(IFN-γ)的含量.同时用佛波酯(PMA,10 ng/ml)和离子霉素(1μg/ml)刺激淋巴细胞5h后,胞内细胞因子染色,流式细胞术检测Th17细胞的含量和其他细胞因子的产生.结果 ELISA检测结果显示,感染小鼠肠系膜淋巴结培养物上清液中IFN-γ [(214.3±62.6) pg/ml]和IL-17[(176.8±62.1) pg/ml]的含量明显高于健康小鼠[(46.7±13.9)和0pg/ml] (P＜0.05).RT-PCR检测结果显示,IL-17和ROR-γt mRNA转录水平也明显高于健康小鼠.感染小鼠肠系膜淋巴细胞CD4+T细胞中,Th17细胞的比例为(0.55±0.03)％,明显高于健康小鼠[(0.16±0.01)％] (P＜0.05).在CD4+T细胞中,IL-17+ IL-4+细胞占0.06％,IL-17+ IFN-γ+和IL-17+ IL-5+细胞各占0.02％,IL-17+ IL-9+细胞占0.01％,未检测到IL-17+ IL-10+和IL-17+Foxp3+细胞.结论 日本血吸虫感染C57BL/6小鼠的肠系膜淋巴结能诱导Th17细胞产生.Th17细胞能分泌IL-4,及少量的IFN-γ、IL-5和IL-9,不分泌IL-10,也不表达Foxp3.
日本血吸虫、C57BL/6小鼠、肠系膜淋巴结、Th17、细胞因子
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R392.1
国家自然科学基金30901353;湖南省自然科学基金11JJ3103;广州市科技新星项目2011J22007
2012-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
258-261,267
