弓形虫POP2-SAG1重组复合蛋白及其重组质粒的免疫效应
目的 研究弓形虫棒状体蛋白2(ROP2)和膜表面蛋白1(SAG1)重组复合抗原(ROP2-SAG1)的核酸和蛋白两种疫苗的免疫效应.方法 60只雌性BALB/c小鼠随机均分为4组(每组15只),即rROP2-SAG1蛋白组、无菌生理盐水组、pcROP2-SAG1质粒组和pcDNA3.1质粒组,rROP2-SAG1组以2.5 μg rROP2-SAG1重组蛋白与等体积佐剂乳化后,背部皮下多点免疫小鼠;无菌生理盐水组以等体积无菌生理盐水替代重组蛋白,首次免疫使用福氏完全佐剂,其余使用福氏不完全佐剂.pcROP2-SAG1组和pcDNA3.1组分别以pcROP2-SAG1和空质粒pcDNA3.1腿部肌肉注射免疫,剂量为100 μg/次;以上各组小鼠共免疫3次,每次间隔2周.采用间接ELISA方法检测免疫后25、45和70 d小鼠血清中特异性IgG抗体,及末次免疫后2周小鼠血清特异性IgG1和IgG2a抗体.用CCK-8细胞增殖法检测小鼠脾细胞增殖,间接ELISA法检测小鼠脾细胞培养上清液中γ干扰素(IFN-γ)和白介素2(IL-2)表达水平.结果 rROP2-SAG1组小鼠血清特异性IgG抗体水平随着免疫时间的延长持续升高,pcROP2-SAG1质粒组抗体则随着免疫时间的延长相对稳定.末次免疫后2周,rROP2-SAG1组小鼠血清IgG1抗体水平(1.538±0.183)显著高于IgG2a(0.618±0.122)(P＜0.05),而pcROP2-SAG1组IgG1抗体水平(1.107±0.137)与IgG2a(0.830±0.185)间的差异无统计学意义(P＞0.05).以特异性抗原rROP2-SAG1为刺激物时,rROP2-SAG1组小鼠脾细胞受特异性抗原刺激的增殖效果(A450值=0.348±0.042)显著高于pcROP2-SAG1组(0.123±0.018)(P＜0.05).rROP2-SAG1组小鼠脾细胞培养上清液中IFN-γ含量[(149.37±30.51) pg/ml]、 IL-2含量[38.58±9.10) pg/ml], 分别与pcROP2-SAG1组IFN-γ[(138.58l±29.92) pg/ml]、 IL-2[37.47l±9.26) pg/ml]比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 ROP2-SAG1重组复合蛋白诱导的抗体水平、脾细胞增值效应显著高于重组质粒pcROP2-SAG1.
刚地弓形虫、棒状体蛋白2、速殖子主要表面蛋白1、疫苗
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R382.5(医学寄生虫学)
浙江省自然科学基金Y205567;浙江省医药卫生科学研究基金2007B137
2011-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
359-363
