鼠尿液中弓形虫B1基因实时荧光定量PCR检测方法的建立
根据GenBank中弓形虫B1基因序列,设计1对引物和1条TaqMan探针.从感染弓形虫小鼠尿液提取弓形虫总DNA,先用普通PCR扩增获得目的基因产物,将纯化的回收产物与pMD18-T载体连接,测序证实为目的片段后,制备系列浓度参照品.再优化实时荧光定量PCR反应体系,并对体系的灵敏度、重复性、线性、特异性和参照品稳定性进行评价.其灵敏度为104拷贝/ml;批内变异系数为2.42%,批间变异系数为4.18%,线性为103～107拷贝/ml,特异性为100%,参照品稳定.该法检测鼠尿样弓形虫DNA具有方便、灵敏、特异和重复性好等优点.
小鼠、尿液、刚地弓形虫、实时荧光定量聚合酶链反应
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R382.5(医学寄生虫学)
绍兴市科学技术局2008年科技计划2008D10037;浙江省科技厅面上社会发展项目2009C33035
2011-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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