弓形虫表面抗原SAG4基因的克隆、表达和鉴定
目的 对弓形虫表面抗原SAG4基因进行克隆、表达和免疫反应性分析.方法 根据弓形虫RH株SAG4基因序列(GenBank登录号为AF340224.1)设计引物,体外扩增目的 基因,并将其克隆至pMD19-T载体,经PCR和双酶切鉴定并测序,亚克隆至pET28a(+)质粒,转化大肠埃希菌BL21,经异丙基-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过十二烷基硫酸钠-聚内烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析SAG4重组蛋白的表达情况,蛋白质印迹(Western blot-ting)分析该蛋白与弓形虫慢性感染小鼠血清的免疫反应性. 结果 扩增获得的目的 基因片段为537 bp.生物信息学分析表明重组基因编码产物为弓形虫SAG4抗原.是一种外膜蛋白.重组菌经IPTG诱导后,以包涵体的形式稳定表达SAG4.Western blotting分析结果 表明,诱导表达的蛋白能被弓形虫慢性感染小鼠血清识别,其相对分子质量(Mr)约为18 740.结论 重组蛋白SAG4有一定的免疫反应性.
弓形虫、SAG4、克隆表达、免疫反应性
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R382.5(医学寄生虫学)
广西科学研究与技术开发计划0443004-36
2009-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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340-343
