10.3969/j.issn.1000-7423.2008.06.022
马来丝虫肌球蛋白部分编码基因Bm-M55的克隆与真核表达
根据马来丝虫肌球蛋白部分编码基因(Bm-M55)序列设计引物,以其微丝蚴总RNA为模板,反转录PCR扩增目的 基因.用TA克隆方法将目的 基因克隆至载体pGEM-T Easy中,经PCR和双酶切鉴定并测序后,亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/Bm-M55,转染COS-7细胞后进行RT-PCR验证.用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)对获得重组蛋白Bm-M55进行分析和鉴定.RT-PCR鉴定结果显示,转染的COS-7细胞表达了Bm-M55基因.根据克隆的目的 基因序列推导的氨基酸序列与GenBank(登录号为AAA27858)中的一致,重组蛋白Bm-M55相对分子质量(Mr)约为55 000.
马来丝虫、肌球蛋白、真核表达载体、COS-7细胞
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R383.161(医学寄生虫学)
江苏省社会发展科技计划项目BS2006522
2009-03-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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