10.3969/j.issn.1000-7423.2008.02.007
伯氏疟原虫T细胞免疫调节蛋白类似基因的原核表达和抗体制备
目的 克隆伯氏疟原虫T细胞免疫调节蛋白(PbTIP)类似基因,原核表达PbTIP重组蛋白,并制备其抗血清.方法 在GenBank中检索PbTIP类似基因序列,设计特异性引物,从伯氏疟原虫ANKA株扩增获得该基因cDNA片段,克隆人原核表达载体pGEX4T-1并转化大肠埃希菌BL21(DE3).经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)鉴定重组蛋白.用重组蛋白GST-PbTIP包涵体免疫BALB/c小鼠,以间接荧光抗体试验(IFAT)和Western blotting鉴定产生的抗体.结果 获得了纯化的重组蛋白GST-PbTIP及其相应抗体,该抗体可以识别相对分子质量(Mr)约为60000的伯氏疟原虫感染红细胞内的PbTIP蛋白.结论 获得PbTIP重组蛋白及其相应抗体.
伯氏疟原虫、T细胞免疫调节蛋白、原核表达
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R382.31(医学寄生虫学)
2008-07-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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110-112,118