10.3969/j.issn.1000-7423.2008.01.005
日本血吸虫表膜蛋白Tetraspanin 2-A基因的克隆、表达与鉴定
目的 扩增并表达日本血吸虫表膜蛋白(sjTsp2-A)基因SjTsp2.方法 根据与曼氏血吸虫表膜蛋白SmTsp2基因同源的SjTsp2序列(编号为AY810722)设计引物,体外扩增目的 蛋白基因,并将其亚克隆入原核表达载体pET28a,转化至大肠埃希菌(E.coli) BL21株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用纯化的重组蛋白免疫小鼠,EUSA检测其血清抗体效价,蛋白质印迹(Westem blottinK}分析鉴定其免疫反应性.结果 PCR扩增获得SjTsp2基因大环核苷酸序列为228 bp,与曼氏血吸虫表膜蛋白(SmTsp2)的氨基酸序列同源性为52%.SjTsp2基因亚克隆人pET28a并可溶性表达,免疫小鼠可产生高滴度(最高1:32 000)特异性抗体.Westem bloning分析结果表明,纯化的SiTsp2.A蛋白能被疫区居民血吸虫抗体阳性者血清、急性及慢性血吸虫病患者血清识别,与健康人血清无反应. 结论 日本血吸虫表膜蛋白基因SjTspp2在体外获得表达,其表达蛋白具有一定的抗原性.
日本血吸虫、膜蛋白、四跨膜超家族蛋白、基因、抗原性
26
R383.24(医学寄生虫学)
安徽省自然科学基金050430805;安徽省教育厅科研项目2006KJ3586
2008-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
21-24
