10.3969/j.issn.1000-7423.2005.03.001
弓形虫致密颗粒蛋白GRA8截短型片段在原核中的表达
目的构建弓形虫GRA8原核重组表达质粒,分析其表达状况.方法采用PCR技术扩增GRA8及其截短型片段的基因序列,经克隆后,亚克隆至原核表达载体中,构建GRA8及其截短型片段的重组表达质粒,分析GRA8的表达;将各重组菌进行诱导,将裂解上清用谷胱甘肽-琼脂糖亲合层析法和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)纯化目的蛋白,免疫印迹法(Western blotting)分析纯化蛋白的活性.结果GRA8基因被正确插入原核表达质粒中,原核重组表达质粒在大肠埃希菌JM109中表达GRA8的水平低,几乎无完整GRA8的表达,截短型GRA8经谷胱甘肽-琼脂糖亲合层析法和SDS-PAGE获得纯化.纯化的截短型GRA8能被弓形虫感染兔血清识别.结论GRA8的原核重组表达质粒表达GRA8的水平低,纯化的截短型GRA8具一定的抗原反应性.
弓形虫、致密颗粒蛋白、GRA8、表达
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R382.5(医学寄生虫学)
2005-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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129-134
