10.3969/j.issn.1000-7423.2005.02.012
抗重组日本血吸虫P38抗原单克隆抗体的制备与鉴定
目的在大肠埃希菌中可溶性表达日本血吸虫P38(SjP38)抗原分子,并以其纯化产物为抗原,制备抗SjP38单克隆抗体(McAb).方法将pET32(a)-P38重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),在1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导下表达,超声破菌后获得可溶性表达产物,通过镍柱一步法纯化,以纯化的重组SjP38为抗原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb,用ELISA和有限稀释法筛选出高分泌滴度McAb杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及其效价,蛋白质印迹法(Western blotting)分析其特异性.结果筛选出能稳定分泌抗重组SjP38单克隆抗体的8株杂交瘤细胞株,均为IgG1;Western blotting分析显示8株单抗能与日本血吸虫虫卵抗原中的天然P38发生特异性结合.结论制备的抗P38杂交瘤细胞株能分泌高滴度、高特异性的McAb.
日本血吸虫、P38抗原、可溶性表达、纯化、单克隆抗体
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R383.24(医学寄生虫学)
WHO/TDR研究项目A990310,A00191
2005-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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