10.3969/j.issn.1000-7423.2002.02.001
恶性疟原虫GBP130基因5′近端侧翼序列调控功能的研究
目的对GBP130的5′近端侧翼序列进行分析,发现可能的强度和期特异性调控元件.方法构建含有不同长度GBP130启动子的质粒载体.用pCBPCAT△2、pGBP△2/400和pGBP△2/800分别转染疟原虫,在转染后48 h收集虫体制备细胞抽提物,检测报告分子CAT活性,分析近端侧翼序列不同区域的强度调控功能.另将pGB△2/400和pGBP△2/g00分别同时转染疟原虫,分别于转染后5 h、15 h和46 h收集虫体,制备细胞抽提物,检测CAT活性,分析近端侧翼序列不同区域的期特异性调控功能.结果强度分析中,当从转录起始点下游删除较小的片段(pGBP△2/800),CAT表达水平与pGBPCAT△2中CAT水平无显著性差异(P>0.05),当删除近端较大片段(pGBP△2/400)时,CAT表达水平明显下降(P<0.05).同时pGBP△2/400的转录活性与对照组也有显著性差异(P<0.05);期特异性分析,pGBP2△/400与pGBP△2/800相比,在5 h时前者转录活性高于后者,但在15 h和46 h时,后者转录活性高于前者,提示2种质粒在疟原虫不同生活阶段具有期特异性调控.结论推测不同GBP130启动子活性强度的差异是因为5'UTR长度的不同,较长的UTR可促进基因的转录表达,可能GBP130基因近端侧翼序列中2个同聚pdy(dA:dT)结构在强度调控中也具有作用.侧翼序列中5'UTR的长度在GBP130基因的期特异性调控中也具有重要作用,即含有较短5′UTR的启动子主要在环状体期具有增强转录的活性,而较长的5'UTR主要在滋养体期和裂殖体期促进启动子的转录活性.
恶性疟原虫、转染、血型糖蛋白结合蛋白130、基因调控
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R382.312(医学寄生虫学)
国家自然科学基金39900128
2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
65-71
