10.3969/j.issn.1000-7423.2001.05.007
弓形虫P30基因重组质粒的构建及其免疫效果
目的通过构建含弓形虫玛0不同表达形式(膜型、分泌型及细胞内型)的重组质粒,并将其用于免疫小鼠,测定抗体水平,以期初步筛选出一种对弓形虫感染具有良好保护作用的核酸疫苗. 方法利用PCR技术和亚克隆技术分别构建弓形虫表膜型P30基因重组质粒(含完整的P30编码序列,包括信号肽及疏水尾)pcDNA3-P30Mb,分泌型P30基因重组质粒(含完整的P30编码序列,不包括疏水尾)pcDNA3-P30Se以及细胞内型P30基因重组质粒(含完整的P30编码序列,但不包括信号肽)pcDNA3-P30In.将以上3种重组质粒分别与脂质体混合后免疫小鼠,ELISA及免疫印迹测定小鼠血清中特异的IgG抗体.结果成功构建了弓形虫P30基因3种表达形式的重组质粒,经双酶切鉴定及DNA序列测定,3种重组质粒中的插入片段确为P0的编码基因,且读码框架正确;抗体测定显示:3个免疫组均能诱导小鼠产生特异的IgG抗体,但各组之间IgG出现的时间及强度有一定的差异.结论用编码弓形虫P30抗原的重组质粒进行核酸免疫,能诱导免疫小鼠产生特异性的IgG抗体;膜型及分泌型免疫小鼠的特异IgG抗体出现的时间早于细胞内型免疫鼠,但4 wk后3组间差异无显著性.
弓形虫、P30、核酸免疫
19
R382 5(医学寄生虫学)
香港研究资助局资助项目CUHK 4142/98M;广东省卫生厅科研项目99M01203 G
2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
282-286
