10.3969/j.issn.1000-7423.2001.03.007
日本血吸虫10.6 kDa膜蛋白基因的克隆及表达
目的寻找新的预防日本血吸虫感染疫苗候选分子.方法用具保护性的抗血吸虫膜单抗及免疫血清筛选日本血吸虫cDNA文库,PCR扩增cDNA插入片段,A-T连接法将筛选获得的3个基因片段克隆到pGEM-T载体上,自动测序仪测序,序列送BLAST基因服务站进行同源性分析.重新设计引物扩增编号为B8克隆的开放阅读框碱基序列,先将其克隆入pGEM-T载体质粒,再定向亚克隆人pBK-CMV表达质粒,IPTG诱导表达后用SDS-PAGE和Western blotting分析表达产物.结果经双酶切及PCR法均证实基因重组成功.其特异性表达产物约为10.6 kDa蛋白抗原.表达产物可被免疫血清及单抗识别.结论构建了编码日本血吸虫10.6kDa蛋白基因表达克隆.
日本血吸虫、cDNA、基因克隆、表达、疫苗
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R382.312(医学寄生虫学)
国家自然科学基金39570646;安徽省科技厅科研项目0022031;安徽省教育厅科研项目99j101112
2004-08-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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