IL-1β参与调控BCG感染RAW264.7细胞凋亡的研究
目的 白细胞介素-1β Interleukin-1β,IL-1β)属多肽类生长因子,主要由单核细胞和巨噬细胞分泌.IL-1β可参与细胞分化、增殖等多种细胞的生命活动,并参与调控细胞凋亡过程.本研究旨在探讨IL-1β参与卡介苗(BacillusCalmette-Guerin,BCG)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡作用及其机制. 方法 设计并合成IL 1β的小干扰RNA(si-IL-1β),转染小鼠巨噬细胞RAW264.7后并用BCG感染,采用MTT法检测RAW264.7细胞存活率,ELISA法检测细胞培养液上清中IL-1β的分泌水平,DCF法检测细胞内ROS水平,AnnexinV-FITC/碘化丙啶(propidine iodide,PI)双荧光染色法结合流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR和Western blot法检测凋亡相关因子Caspase3、Bad、Bax以及Mcl-1蛋白及其基因(mRNA)的表达. 结果 BCG感染巨噬细胞24 h后,IL-1β表达水平极显著上调,并且呈时间梯度依赖性(P＜0.01);同时,与对照相比,BCG感染后巨噬细胞存活率下降,约为33％,而凋亡率显著上调到58.56％ (P＜0.01),并且凋亡关键调控因子Caspase3、Bad、Bax的mRNA及蛋白表达水平显著上调(P＜0.01),而抑凋亡蛋白Mcl-1的表达水平显著下调(P＜0.01),细胞内ROS富集(P＜0.05),而si-IL-1β处理可显著逆转由BCG诱发的细胞凋亡、ROS含量富集及凋亡相关蛋白表达水平上调等. 结论 BCG可诱导细胞内IL-1β的表达;IL-1β通过上调促凋亡蛋白Bad、Bax表达,下调抑凋亡蛋白Mcl 1表达,上调细胞内ROS的表达并参与调控BCG诱导的巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡.这为阐明IL-1β在BCG诱导的细胞凋亡中的作用奠定了分子基础.
IL-1β、RAW264.7细胞、BCG、细胞凋亡
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R378.911(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;创新项目;人才培养项目;宁夏回族自治区重点研发计划项目
2019-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
386-393
