含内参基因的高灵敏度生殖支原体双重荧光PCR方法的建立
目的 建立一种含有人源性内参基因的高灵敏度双重荧光PCR方法, 以期用于生殖支原体感染的快速检测.方法 根据生殖支原体MgPar重复序列中保守区域设计并合成特异性扩增引物和探针, 添加人β-globin基因检测引物探针作为体系检测内参, 建立并优化荧光PCR方法, 使用标准浓度核酸进行扩增效率、灵敏度及特异度评价;用该方法检测62份临床标本, 并与Mg-Pa荧光PCR结果相比较.结果 建立的基于重复序列的荧光PCR方法对生殖支原体的检测限为0.5拷贝, Mg-Pa荧光PCR的检测限提高了一个数量级.该方法扩增16种其他支原体和常见生殖道致病菌均为阴性, 特异度为100％.62份临床标本β-globin基因扩增均阳性, 生殖支原体检测阳性率为3.2％ (2/62) .结论建立的带内参检测生殖支原体的双重荧光PCR方法快速、灵敏、特异, 并通过对标本进行质控, 减少了假阴性结果的产生, 提升了检测的准确性, 具有良好的应用前景.
生殖支原体、实时荧光PCR、内参、人β-globin基因
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R375(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
2018-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
714-718
