刚地弓形虫致密颗粒蛋白GRA7基因的重组、表达及鉴定
目的 构建弓形虫致密颗粒蛋白7(GRA7)基因重组质粒并在大肠埃希菌中进行表达. 方法 根据GRA7基因序列设计合成引物,用PCR方法从弓形虫基因组DNA中扩增GRA7基因片段,再克隆到pGEX-4T载体中,重组质粒经酶切、PCR鉴定并测序;重组质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析并纯化,Western blot分析其反应原性. 结果 GRA7基因PCR产物大小约为714 bp,与预期相符;重组质粒经酶切及PCR鉴定构建成功,测序结果与已知序列吻合;重组质粒转化菌经IPTG诱导后表达的GRA7融合蛋白分子质量单位约为53ku,该蛋白可被His标签抗体识别. 结论 成功重组了弓形虫GRA7基因,表达蛋白具有反应原性,为弓形虫诊断抗原试剂盒的制备奠定了基础.
弓形虫、致密颗粒蛋白7、融合蛋白、蛋白纯化
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R382.5(医学寄生虫学)
2014-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
245-248
