十二指肠钩虫热休克蛋白HSP60基因的克隆及重组表达
目的 克隆十二指肠钩虫(Anc ylostoma duodenale)热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)基因,并在大肠埃希菌中表达获得重组AduHSP60蛋白.方法 以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,PCR扩增AduHSP60基因.将获得的目的基因编码序列连接至原核表达载体pETHF,构建重组表达质粒pETHF/AduHSP60.重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达、Ni-NTA亲和层析分离纯化重组蛋白,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达及纯化情况.结果 成功扩增到AduHSP60全长编码序列,编码序列长度为1 701 bp,编码566个氨基酸.构建了重组表达质粒pETHF/AduHSP60,经诱导表达、分离纯化获得了分子质量单位为60 ku的可溶性重组AduHSP60蛋白.结论 本研究从十二指肠钩虫中分离获得了HSP60基因,构建的pETHF/AduHSP60重组质粒能在大肠埃希菌中表达重组蛋白,为进一步研究AduHSP60的生物学功能奠定了基础.
十二指肠钩虫、热休克蛋白60、克隆、原核表达
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R383.13(医学寄生虫学)
2013-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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