人肠道病毒71型3A蛋白的原核表达及抗体制备
目的 构建人肠道病毒71型3A基因原核表达质粒,制备重组3A蛋白及其抗体. 方法 PCR方法扩增人肠道病毒71型3A基因,构建原核表达质粒PET28a-3A并转化大肠埃希菌,诱导表达3A重组蛋白,免疫小鼠制备3A蛋白抗体.通过免疫荧光和Western blot方法鉴定抗体特异性. 结果 成功构建了PET28a-3A原核表达质粒并表达了3A重组蛋白,3A蛋白以包涵体的形式存在.细胞免疫荧光和Western blot检测显示,制备的鼠源3A蛋白抗体可识别真核表达的EGFP-3A融合蛋白以及EV71感染细胞表达的3A蛋白. 结论 成功构建了人肠道71型3A基因原核表达质粒,利用该质粒表达的重组蛋白成功制备了特异性的3A蛋白的鼠源抗体.
人肠道病毒71型、3A蛋白、多克隆抗体
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R373.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
华中师范大学中央高校基本科研业务费项目资助CCNU10A01018
2013-07-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
507-509,513