MISⅡR启动子的克隆及其组织特异性鉴定
目的 克隆苗勒氏管抑制物Ⅱ型受体启动子(mullerian inhibiting substance type Ⅱ receptor promoter,MISⅡRpr)并鉴定其在卵巢器官中的特异性表达活性.方法利用PCR从C57BL/6小鼠基因组中扩增苗勒氏管抑制物Ⅱ型受体启动子并将其克隆入载体pMD18-T,测序正确后将其亚克隆入pGL_3-Basic荧光素酶报告基因载体.将重组质粒pGL_3-Basic/MISⅡRpr分别转染卵巢癌细胞系SKOV3、HT-8910,宫颈癌细胞系Hela、SiHa,绿猴肾细胞系COS-7,乳腺癌细胞系MDA-MB-231和结肠癌细胞系HT-29,通过双荧光素酶检测系统检测荧光素酶在上述细胞系中的活性,以确定克隆的苗勒氏管抑制物Ⅱ型受体启动子是否具有卵巢特异性活性.结果 构建的pGL_3-Basic/MISⅡRpr质粒用SacⅠ和EcoRⅠ双酶切,片段大小分别为600 bp和1 000 bp,证明MISⅡRpr插入正确.重组质粒转染卵巢细胞系SKOV3、HT-8910,荧光素酶高表达;对照细胞HT-29等转染后,荧光素酶低表达.结论 克隆得到的MISⅡRpr具有明显的卵巢特异性活性.可以利用MISⅡRpr进行相关基因的卵巢特异性表达.
苗勒氏管抑制物Ⅱ型受体启动子 (MISⅡRpr)、组织特异性、荧光素酶
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R347.91(人体生物化学、分子生物学)
2010-01-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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