10.3969/j.issn.1673-5234.2006.05.007
约氏疟原虫235 ku多基因家族的基因克隆和序列分析
目的 克隆约氏疟原虫不同虫期235 ku棒状体蛋白(Plasmodium yoelii yoelii 235 ku rhoptry proteins,Py235)的基因,并对其进行序列测定和分析.方法 根据疟原虫棒状体235 ku蛋白的基因序列,设计引物.用Tripure与氯仿等试剂提取不同时相点的约氏疟原虫总RNA,逆转录合成cDNA,用PCR的方法扩增Py235基因片段.将获得的预期大小的PCR产物插入PMD18-T克隆载体,转化XL1-Blue感受态细胞,蓝白筛选白色克隆,进行体外扩增,提取质粒,进行酶切鉴定,对含有目的插入片段的克隆进行序列测定. 结果从不同侵入虫期的疟原虫总RNA中成功克隆出292 bp Py235基因片段,测序结果与GeneBank报道序列具有很高的相似性.结论 在疟原虫235 ku多基因家族,不同侵入虫期疟原虫Py235基因的mRNA转录与表达具有一定的遗传稳定性,但表型也有变异,从而获得侵入不同宿主细胞的功能.
疟原虫、约氏、Py235、基因克隆、克隆表型变异
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R382.31(医学寄生虫学)
国家自然科学基金30371261;30271163
2007-01-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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