10.3969/j.issn.1673-5234.2003.01.013
多房棘球绦虫elp基因在真核细胞COS7中的表达
目的构建中国四川株多房棘球绦虫elp基因真核表达载体,为核酸疫苗研究奠定基础. 方法应用RT-PCR方法从多房棘球绦虫续绦期幼虫RNA获得elp基因的编码序列,定向克隆于pGEM-11zf(+).经酶切鉴定及测序后将目的基因亚克隆于真核表达载体pcDNA3.1(+).重组真核表达载体pcD-ELP鉴定后,纯化无内毒素的重组质粒,电穿孔方法转染哺乳动物细胞COS7.RT-PCR、dot-ELISA和免疫组化方法鉴定目的基因在COS7细胞中的表达. 结果琼脂糖凝胶电泳、酶切及序列分析证实多房棘球绦虫elp基因编码区已成功地克隆于真核表达载体pcDNA3.1(+).RT-PCR、dot-ELISA和免疫组化证实,重组质粒在哺乳动物细胞COS7中能够表达多房棘球绦虫ELP抗原. 结论成功地构建了中国四川株多房棘球绦虫elp基因的真核表达载体,该载体在COS7哺乳动物细胞中能表达ELP抗原,为多房棘球绦虫elp基因疫苗研究奠定了基础.
多房棘球绦虫、elp基因、真核表达、COS7、RT-PCR、dot-ELISA、免疫组化
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R383.33(医学寄生虫学)
重庆市卫生局资助项目99-1003
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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