10.3969/j.issn.1004-8812.2016.08.007
尾加压素Ⅱ诱导巨噬细胞分泌巨噬细胞集落刺激因子
目的 探索尾加压素Ⅱ(UⅡ)能否促进小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞分泌巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF),并探讨相关的信号机制.方法 培养小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞,以Real-time PCR法和ELISA法分别检测细胞的M-CSF mRNA和蛋白表达水平,用细胞免疫印迹法检测p38MAPK和ERK的磷酸化水平.结果 UⅡ呈浓度依赖性和时间依赖性促进RAW264.7细胞中M-CSF mRNA和蛋白水平的表达,最大效应时间均为刺激12h,M-CSF mRNA水平是对照组水平的2.73倍,蛋白表达水平显著高于对照组水平[(50.04±4.28) pg/ml比(20.39±2.75) pg/ml,P＜0.01],是对照组水平的2.45倍;最大效应浓度均为10-8 mol/L和10-7 mol/L,以10-8 mol/L UⅡ刺激12 h,M-CSF的mRNA和蛋白表达水平较对照组分别增加了97.3％和80.8％.采用UⅡ受体(UT)阻断剂Urantide、ERK阻断剂PD98059和p38MAPK阻断剂SB203580分别预处理细胞后,M-CSF蛋白水平较UⅡ组显著降低,分别为[(45 ±4.04) pg/ml比(57.47±2.93) pg/ml]、[(42.13±4.28) pg/ml比(57.47 ±2.93) pg/ml]和[(44±5.34) pg/ml比(57.47±2.93) pg/ml],差异均有统计学意义(均P ＜0.05).10-8 mol/L UⅡ刺激细胞3 min显著促进ERK和p38MAPK蛋白磷酸化,5 min时ERK磷酸化水平达到峰值,至15 min仍持续高值,而p38MAPK在15 min时磷酸化达到峰值;30 min时,两者的磷酸化水平均减弱.结论 UⅡ可通过与受体结合活化ERK和p38MAPK信号通路促进RAW264.7细胞中M-CSF的表达.
巨噬细胞集落刺激因子、炎症、尾加压素Ⅱ
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R363(病理学)
高等学校博士学科点专项科研基金20120001120010
2016-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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