10.16372/j.issn.1004-6364.2022.10.007
禽脑脊髓炎病毒外壳蛋白VP1的原核表达及活性鉴定
为研究禽脑脊髓炎病毒(Avian encephalomyelitis virus,AEV)外壳蛋白VP1的免疫原性,研究根据AEV-187株VP1基因序列,设计一对表达引物,利用RT-PCR扩增获得了 828 bp片段,成功构建表达质粒pET-32a-VP1,将质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,获得工程菌株pET-32a-VP1-BL21(DE3),经IPTG诱导后,采用 SDS-PAGE、Western blot检测 VP1 蛋白的表达形式及反应活性;采用表达的VP1蛋白制备疫苗免疫SPF鸡,检测免疫后血清中AEV抗体水平.结果显示:VP1蛋白为部分可溶性表达,分子量为50 ku;与AEV阳性鸡血清能够发生反应;采用VP1蛋白制备的疫苗安全性良好,免疫SPF鸡后14 d即可检测到AEV抗体,免疫后21 d和28 d的抗体水平有大幅度增长,阳性率达到80％,证明表达的VP1蛋白具有免疫原性.综上所述,原核表达的VP1蛋白具有良好的抗原活性,为AEV亚单位疫苗的研制奠定了基础.
禽脑脊髓炎病毒、VP1、原核表达、活性分析
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S855.3(动物医学（兽医学）)
山东滨州沃华生物工程有限公司科研基金202102QB02-01
2022-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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