10.16372/j.issn.1004-6364.2020.09.003
GST pull-down联合质谱分析技术筛选鸡NOS2的互作蛋白
为了筛选NOS2在鸡雄性生殖细胞形成过程中的互作蛋白,通过克隆NOS2序列,构建pGEX-6p-NOS2原核表达载体且诱导表达NOS2蛋白,采用GST pull-down联合质谱分析技术筛选与鸡NOS2相互作用的蛋白质.结果 显示:经GST pull-down质谱分析鉴定到316个与鸡NOS2相互作用的候选蛋白质,其中12个高评分蛋白具有相同的功能注释,参与精子运动调控,且主要分布在细胞质、细胞核等细胞组分中,可能通过与其它蛋白质、核酸等分子结合而参与MAPK、Notch等信号通路;质谱分析还发现GOT1蛋白与NOS2互作最为明显,该蛋白参与Notch信号通路,后续将作为重点候选互作蛋白以探究其与NOS2蛋白的互作方式.该结果为进一步探究NOS2在鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化中的调控机制奠定了实验基础.
NOS2、GST pull-down、质谱分析技术、蛋白质相互作用
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S831.2(家禽)
江苏省大学生创新创业训练计划;江苏高校优势学科建设工程项目
2020-10-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
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