10.16372/j.issn.1004-6364.2020.06.008
鼠伤寒沙门菌SseB和SseL蛋白的原核表达和多克隆抗体的制备
为制备鼠伤寒沙门菌SseB和SseL蛋白的特异性多克隆抗体(多抗),以鼠伤寒沙门菌S025为供体菌,PCR扩增sseB和sseL基因,插入原核表达载体pGEX-6P-1,转化BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达,获得纯化蛋白免疫小鼠制备多抗;使用λ-red同源重组方法构建sseB和sseL基因缺失株;通过野生株和缺失株的Western-blot分析验证制备血清的特异性.结果 显示:成功构建出重组质粒pGEX-6P-1-sseB和pGEX-6P-1-sseL,转化感受态细胞后,在IPTG 1 mmol/L、温度28℃、转速为220 r/min、诱导时间12h的条件下,SseB和SseL蛋白呈可溶性表达;纯化蛋白免疫小鼠制备了多抗,Western-blot分析显示该多抗可特异性检测鼠伤寒沙门菌中的SseB和SseL蛋白.这两种蛋白多抗的获得为进一步研究其功能奠定基础.
鼠伤寒沙门菌、SseB、SseL、原核表达、多克隆抗体
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S855.1(动物医学（兽医学）)
国家自然科学基金;江苏省重点研发计划;江苏高校优势学科建设工程项目
2020-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
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