10.16372/j.issn.1004-6364.2020.06.003
鸡lncRNA-CEPT8启动子验证及活性核心区域筛选
研究旨在筛选鸡lncRNA-CEPT8启动子核心区域并验证其启动活性.采用qRT-PCR检测lncRNA-CEPT8在鸡不同组织中表达情况.生物信息学预测lncRNA-CEPT8启动子区域,PCR扩增启动子并构建pEGFP-lncCEPT8重组载体,转染DF-1细胞后48h进行荧光观察.再构建启动子系列缺失载体(pGL3-p1、pGL3-p2、pGL3-p3、pGL3-p4、pGL3-p5),分别转染DF-1细胞后48 h检测双荧光素酶活性,分析缺失载体的启动活性.结果 表明,lncRNA-CEPT8在鸡生殖嵴中特异性高表达,pEGFP-lncCEPT8重组载体转染DF-1细胞后有绿色荧光.缺失载体pGL3-p4与pGL3-p3相比,活性极显著下降(P<0.01).研究明确了lncRNA-CEPT8上游-1 174~-1 bp处为启动子,且-627~-429 bp是启动子核心区域,为进一步研究其表达调控机制提供理论依据.
鸡、启动子、lncRNA、核心区域
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S831.2(家禽)
江苏省科技计划;江苏省高等学校自然科学研究项目;江苏省研究生科研与实践创新计划项目;国家重点研发计划;国家自然科学基金
2020-07-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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