10.3969/j.issn.1004-6364.2007.15.006
H5亚型AIV HA基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达
应用DNAStar软件,参照GenBank中注册的AIV H5亚型毒株HA基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR方法成功地扩增出带双酶切位点的H5亚型AIV的HA基因,通过BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切位点将H5 HA基因插入转移质粒载体pFastBacHTa中,获得重组转移载体pFastBacHTa-H5HA并将其转化DH10Bac细胞,与Bacmid发生位点特异性转座作用,得到重组穿梭载体Bacmid-H5HA,再将其转染昆虫细胞High Five,PCR鉴定证实该基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下游,经SDS-PAGE和Western blotting检测,HA基因在High Five细胞中得到了表达,表达产物大小约为67 ku,而且具有特异的免疫反应性.
禽流感病毒、血凝素蛋白、昆虫细胞、克隆
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S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)
2007-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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