10.3969/j.issn.1001-5728.2008.02.012
正交设计在实时定量PCR检测条件优化中的应用
目的 探索正交设计在实时定量PCR检测条件优化中的应用,找出扩增ICAM-1基因的最佳条件.方法 建立大鼠皮肤损伤模型,采用正交设计实时定量PCR的各影响条件,提取损伤处皮肤组织总RNA反转录成cDNA,cDNA作为模板,通过特异性引物扩增ICAM-1基因.对扩增曲线和融解曲线制定评分标准,量化不同实验条件下的扩增结果并进行统计分析.结果 退火温度、模板量和引物浓度直接影响扩增效果,但三因素间无相互作用.结果 经统计学分析表明退火温度61℃、模板cDNA用量0.4μg和引物终浓度150μmol/L为实时定量PCR检测ICAM-1基因的最佳条件组合.结论 正交设计是一种切实可行、快速经济的实时定量PCR检测条件优化方法.
法医病理学、正交设计、实时定量PCR、皮肤损伤、ICAM-1
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D9(法律)
山西省留学回国人员科研启动基金200528;山西省青年科研项目2007021047
2008-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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