10.11857/j.issn.1674-5124.2018120114
羰基还原酶基因工程菌产酶和不对称 合成(R)-苯乙醇的条件优化
以羰基还原酶基因工程菌全细胞为催化剂,探讨不对称合成(R)-苯乙醇的各种影响因素,优化其产酶和转化条件.结果表明,优化后的发酵培养基为甘油10 g/L、蛋白胨10 g/L、酵母粉5 g/L,(NH4)2SO45 g/L、NaCl 10 g/L,氨苄青霉素50μg/mL,pH 7.2;诱导剂IPTG的浓度为0.25 mmol/L,诱导时间为20 h,诱导温度为18℃,此条件下测得基因工程菌粗酶活最高为6.65 U/mL.建立的最佳转化条件:羰基还原酶基因工程菌发酵20 h后的细胞浓度为0.3 g/mL,转化体系初始pH为7.0,温度为37℃,辅助底物异丙醇浓度为10%,底物终浓度为60 mmol/L,转化时间为24 h.此时底物转化率最高可达98.88%,产物对映体过量值(e.e.值)为99.43%.反应体系扩增至3000 mL后,产物e.e.值仍保持在99.0% 左右,底物转化率可为92% 以上,(R)-苯乙醇的产量也可达到6.67 g/L.
羰基还原酶、基因工程菌、不对称合成、产酶条件、转化条件
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Q936(微生物学)
四川省科技厅科技支撑项目2016GZ0364;四川省教育厅科研项目16ZA0287,17ZA0102;四川省卫生厅项目18PJ586,16PJ103;成都医学院科研创新团队项目CYTD16-04
2019-05-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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