10.7501/j.issn.0253-2670.2023.12.022
茯苓细胞色素P450基因PcCYP的克隆与序列分析
目的 筛选与茯苓Poria cocos生长发育相关的细胞色素P450基因序列,进一步丰富对茯苓生长发育理解.方法 通过分子克隆到1个茯苓细胞色素P450基因PcCYP,并利用在线工具分析其序列,预测蛋白的理化性质、结构域等分子特征;利用MEGA 5.0分别对氨基酸进行多序列比对和进化关系分析,并采用qRT-PCR方法检测不同发酵培养时间6、8、10 d的相对表达量.结果 从茯苓中克隆到的PcCYP存在可变性剪切,2个选择性剪切体PcCYP1和PcCYP2 CDS区长度分别为1590、1542 bp,分别编码529、513个氨基酸.氨基酸序列分析发现其均具有保守的P450结构域,且具有信号肽和多个磷酸化修饰位点,属于分泌型的不稳定亲水蛋白.氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示PcCYP与担子菌Coprinopsis cinerea的CYP502距离最近,推测PcCYP和CYP502具有相似功能,即参与调控茯苓子实体的发育.定量PCR结果显示,选择性剪接变体PcCYP1的表达量较PcCYP2低,因此PcCYP2是PcCYP基因的主要剪接体.结论 PcCYP与茯苓子实体的生长发育密切相关,为进一步研究PcCYP在茯苓生长发育、遗传规律及育种等方面的生物学功能奠定基础.
茯苓、细胞色素P450、基因克隆、生物信息学分析、基因表达、生长发育
54
R286.12(中药学)
国家自然科学基金;名贵中药资源可持续利用能力建设项目
2023-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
3962-3970
