10.7501/j.issn.0253-2670.2021.18.027
虎掌南星超快速Real-time VPCR闭管检测方法的建立及应用
目的 建立虎掌南星Pinellia pedatisecta特异性DNA的闭管式超快速检测方法,实现对虎掌南星样本的快速鉴别.方法 针对虎掌南星特异性的DNA序列设计其特异性的引物和TaqMan探针,通过对扩增体系进行优化,建立虎掌南星的超快速实时荧光VPCR扩增体系,实现对虎掌南星特异性DNA的快速扩增和闭管式实时检测.同时对该方法的特异性、灵敏度和实用性进行考察.结果 可以在24 min内完成对虎掌南星特异性DNA的闭管快速扩增检测;检测限低至Pg级DNA;在同科属常见近缘品种中无交叉反应;对采集的7批56个"半夏"样本进行分析,检测出2个批次共16个样本为虎掌南星,且该结果与测序结果100%符合.结论 所建方法可以作为虎掌南星的特异性检测方法,具有灵敏、快速和不易污染等优点,可以为虎掌南星和半夏药材的质量控制提供参考.
虎掌南星;半夏;聚合酶链式反应;快速鉴别;特异性DNA
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R286(中药学)
国家自然科学基金面上项目;成都中医药大学杏林学者学科提升计划;四川高校科研创新团队建设计划
2021-11-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
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