刺五加GAPDH基因的克隆及序列分析
目的 对刺五加Eleutherococcus senticosus GAPDH基因进行克隆及序列分析,使其成为可用的内参照基因.方法 采用改良的异硫氰酸胍法提取刺五加总RNA,运用RT-PCR法克隆GAPDH基因的部分序列,并以其为内参照基因进行半定量PCR.结果 克隆了长度为627 bp的刺五加GAPDH基因,推测其编码209个氨基酸,与三七、人参、拟南芥的GAPDH氨基酸序列同源性分别为97％、93％、93％,核苷酸同源性分别为94％、86％、84％.其作为内参照基因的半定量PCR具有良好的扩增效果和重现性.结论 首次分离并克隆了刺五加GAPDH cDNA,证实该序列可以作为基因表达分析的内参照基因,为刺五加苷生物合成中关键酶的表达分析及调控机制研究奠定基础.
刺五加、GAPDH基因、克隆、序列分析、内参照基因
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R282.12(中药学)
国家自然科学基金资助项目30701086;河北省自然科学基金资助项目C2009001252
2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
155-158
