分享
打开微信,点击底部的“发现”,使用 “扫一扫” 即可将网页分享到我的朋友圈
收藏
摘要: 目的:探讨Anti-白细胞介素(IL)-12/IL-23 p40抗体对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的抑制作用及其机制。方法:选取SPF级健康无眼疾6~8周龄雌性C57BL/6N小鼠66只,其中24只采用光感受器维生素A类结合蛋白(IRBP)651-670诱导小鼠EAU模型,分别在免疫前及免疫后第3、12、18天各取6只小鼠,流式细胞术检测各时间点小鼠脾脏、淋巴结和眼球中IL-17A
+ γ干扰素(IFN-γ)
+ CD4
+ T细胞比例。取6只小鼠制作EAU模型,免疫后18 d采用小动物成像仪进行眼底拍照并行光相干断层扫描(OCT)检查。检查完成后处死小鼠,摘取眼球,采用苏木精-伊红染色法检测小鼠视网膜炎症反应和组织结构形态学改变;取淋巴结行流式细胞术检测IL-17A
+ IFN-γ
+ CD4
+ T细胞比例,按照表达数量不同分为IL-17A
+ IFN-γ
+细胞高表达组和IL-17A
+ IFN-γ
+细胞低表达组,比较2个组小鼠视网膜损伤情况。取36只小鼠制作EAU模型,采用随机数字表法分成Anti-IL-12/IL-23 p40组和IgG组,每组18只,分别尾静脉注射Anti-IL-12/IL-23 p40和IgG,每3天1次。免疫后第12天和第18天每组各取6只小鼠,分别取淋巴结和眼球组织,采用流式细胞仪检测T细胞亚群比例。免疫后第24天,每组各取6只小鼠,摘取眼球,采用苏木精-伊红染色法观察视网膜损害情况;采用流式细胞仪检测CD4
+ T细胞体外诱导分化情况;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-17A
+ IFN-γ
+ CD4
+ T细胞诱导分化后IL-17和IFN-γ表达情况;采用实时荧光定量PCR法检测IL-17A
+ IFN-γ
+ CD4
+ T细胞诱导分化后Th1细胞转录因子T-bet和Th17细胞转录因子维甲酸相关孤核受体γt(ROR-γt)相对表达量。
结果:免疫前和免疫后第3、12、18天,淋巴结、脾脏、眼球中IL-17A
+ IFN-γ
+ CD4
+ T细胞比例总体比较差异均有统计学意义(
H=9.642、16.531、10.385,均
P<0.05),其中与免疫前相比,EAU小鼠免疫后第12天淋巴结IL-17A
+ IFN-γ
+ CD4
+ T细胞比例明显升高;免疫后第18天脾脏、眼球中IL-17A
+ IFN-γ
+ CD4
+ T细胞比例明显升高,差异均有统计学意义(均
P<0.05)。IL-17A
+ IFN-γ
+细胞高表达组小鼠视网膜严重水肿、视网膜脱离、重度炎性细胞浸润和广泛视网膜褶皱;IL-17A
+ IFN-γ
+细胞低表达组小鼠视网膜轻度水肿、局灶性炎性细胞浸润、轻度视网膜褶皱。Anti-IL-12/IL-23 p40组免疫后18 d,眼球中CD3和IL-17A
+ IFN-γ
+ CD4
+ T细胞比例低于IgG组,差异均有统计学意义(
t=15.304、8.080,均
P<0.05);免疫后12 d,Anti-IL-12/IL-23 p40组淋巴结中IL-17A
+ IFN-γ
+ CD4
+ T细胞比例为(0.33±0.18)%,明显低于IgG组的(4.83±0.45)%,差异有统计学意义(
t=15.974,
P<0.001)。与IgG组相比,Anti-IL-12/IL-23 p40组Th1、Th17、IL-17A
+ IFN-γ
+ CD4
+ T细胞百分比及IL-17、IFN-γ、T-bet、ROR-γt表达量明显降低,差异均有统计学意义(均
P<0.05)。
结论:Anti-IL-12/IL-23 p40可通过抑制IL-17A
+ IFN-γ
+ CD4
+ T细胞发挥对EAU的治疗作用。
关键词: 葡萄膜炎、药物治疗、白细胞介素12亚基p40、单克隆抗体、光感受器间维生素A类结合蛋白、小鼠
所属期刊栏目: 40
资助基金: 国家自然科学基金项目81671642、82171042、81870651;天津市科技支撑重点项目20YFZCSY00990;天津市自然科学基金重点项目20JCZDJC00100;天津市医学重点学科(专科)建设项目TJYXZDXK-037A;National Natural Science Foundation of China81671642, 82171042, 81870651;Key Project of Tianjin Science and Technology Support20YFZCSY00990;Key Project of Natural Science Foundation of Tianjin20JCZDJC00100;Tianjin Medical Key Discipline Specialty Construction ProjectTJYXZDXK-037A
在线出版日期: 2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
页数: 共9页
页码: 707-715
英文信息展示
收起英文信息