10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2011.11.014
小鼠角膜基质细胞分泌的转化生长因子β2及前列腺素E2对树突状细胞成熟过程的抑制作用
背景 研究表明,位于角膜中央区的树突状细胞(DCs)完全处于未成熟状态,而位于角膜周边区的DCs则大多处于成熟状态.角膜内的DCs广泛参与多种角膜相关疾病以及角膜移植免疫排斥反应,研究角膜内DCs的成熟状态具有重要意义.目的 探讨小鼠角膜基质细胞(CSCs)是否通过分泌转化生长因子β2(TGF-β2)以及前列腺素E2( PGE2)抑制DCs的成熟.方法 获取DCs、T细胞以及CSCs培养上清液.通过酶联免疫吸附实验( ELISA)测定CSCs培养上清液以及新鲜RPM1 1640培养基内PGE2和TGF-β2的质量浓度.在DCs成熟过程中,应用TGF-β2中和抗体以及PGE2受体阻滞剂AH6809,并按照处理方式的不同分为对照组、CSCs培养上清液组、AH6809组、TGF-β2中和抗体组、AH6809 +TGF-β2中和抗体组.采用流式细胞技术检测DCs细胞表型CD11c、CD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达情况,通过葡聚糖内吞实验检测抗原吞噬功能,并通过混合淋巴细胞反应检测刺激T细胞增生的能力.结果ELISA检测结果显示,与新鲜RPMI 1640培养基相比,CSCs培养上清液内含有较高质量浓度的TGF-β2和PGE2.与CSCs培养上清液组比较,TGF-β2中和抗体组DCs CD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05),葡聚糖的表达降低(P<0.05),刺激指数(SI)增大(P<0.05);AH6809组CD86和MHC-Ⅱ的表达均升高,葡聚糖的表达降低,SI增大,差异均有统计学意义(P<0.05);TGF-β2中和抗体+AH6809组DCs MHC-Ⅱ的表达和SI提高,差异均有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,TGF-β2中和抗体+AH6809组DCs CD80、CD86的表达和SI均较低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论体外培养的小鼠CSCs可以通过分泌TGF-β2及PGE2抑制DCs成熟,且这两种细胞因子可发挥叠加效应.
角膜基质细胞、树突状细胞/成熟、转化生长因子β2、前列腺素E2
29
R772.2(眼科学)
河北省卫生厅科研基金20090125
2012-01-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1010-1015