10.3969/j.issn.1005-7021.2015.05.002
木糖醇脱氢酶基因高拷贝表达载体构建及在酿酒酵母中的表达
木糖醇脱氢酶( xylitol dehydrogenase,XDH)可以氧化木糖醇生成木酮糖,处于木糖代谢的节点位置。利用PCR方法克隆得到了休哈塔假丝酵母( Candida shehatae)20335的木糖醇脱氢酶基因、质粒pKT0150的ADH1终止子序列和G418抗性基因( KanR),以及酿酒酵母( Saccharomyces cerevisiae)W5特定的2.2 kb的rDNA片段。以酿酒酵母整合载体p406ADH1为骨架,利用基因工程手段构建一个多拷贝整合表达载体pLX-AGRX。将重组载体pLX-AGRX线性化转入到酿酒酵母W5后,通过高浓度G418筛选和PCR双重鉴定,证实重组载体pLX-AGRX已整合到酿酒酵母W5基因组上,测定木糖醇脱氢酶酶活可达65.9574 U/mg。
休哈塔假丝酵母、木糖醇、木糖醇脱氢酶、载体构建、酿酒酵母
Q933(微生物学)
国家自然科学基金项目31270143;国家自然科学基金项目31270534;国家自然科学基金项目31470537;黑龙江省高等学校科技创新团队农业微生物发酵技术项目2012td009
2015-12-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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