10.3969/j.issn.1005-7021.2014.04.002
用于高灵敏可视化检测松材线虫的闭管等温扩增法
建立了一种基于环介导等温核酸扩增技术（LAMP）的松材线虫高灵敏可视化闭管检测方法。针对松材线虫核糖体 DNA 的序列保守区域设计 LAMP 引物，通过优化 LAMP 体系中的 Mg2+、甜菜碱浓度和反应温度等因素，建立了环介导等温扩增法；并结合蜡封反应管对产物进行检测，检测结果可直接通过肉眼观察 SYBR Green I 荧光显色进行判定。结果表明，本方法可检测到低至10拷贝/管的松材线虫核酸片段，可对单条线虫进行检测，并且具有很高的特异性，能区分检测松材线虫与拟松材线虫。由于整个反应恒温进行，无需热循环仪；闭管检测极大地降低了扩增产物交叉污染的风险；检测速度快，整个检测过程只需40 min，为松材线虫的现场快速筛检提供了一种简便、高灵敏、高特异的工具。
松材线虫、环介导等温扩增、闭管反应、高灵敏度、可视化检测
Q939.95;S432.4+5(微生物学)
国家重大科技专项2013zx10004103；国家科技转基因生物新品种培育重大专项2011ZX08012-005；国家自然科学基金青年科学基金21005088
2014-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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