PCR-焦磷酸测序技术检测奶牛乳房炎4种主要致病菌方法的建立
应用PCR-焦磷酸测序技术(pyrosequencing)一种新型快速检测奶牛乳房炎(bovine mastitis)4种主要致病菌无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、停乳链球菌(S.dysgalactiae)、沙门氏菌(Salmonella sp.)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的方法.根据GenBank中无乳链球菌的sip基因、停乳链球菌的isp基因、沙门氏菌的stn基因和金黄色葡萄球菌的clfa基因的序列信息,分别设计各基因保守区段的PCR扩增引物及焦磷酸测序引物.分别以108株无乳链球菌、100株停乳链球菌、136株沙门氏菌、203株金黄色葡萄球菌,以及多株其他参照菌为模板,轮流使用上述各扩增引物进行PCR扩增目的基因片段.随后采用焦磷酸测序技术针对阳性PCR扩增片段进行核苷酸保守区段的测序分析.最终得到预期的PCR扩增和焦磷酸测序结果,且实验结果具有可靠的重复性.PCR-焦磷酸测序技术适用于上述奶牛乳房炎4种主要致病菌的检测鉴定,具有准确、快速等优点.
PCR-焦磷酸测序、奶牛乳房炎、无乳链球菌、停乳链球菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌
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S852.6(动物医学(兽医学))
2013-04-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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