10.13995/j.cnki.11-1802/ts.030104
代谢工程构建谷氨酸棒杆菌合成5-氨基乙酰丙酸
非蛋白氨基酸5-氨基乙酰丙酸是合成四氢吡咯化合物的前体物,被广泛应用于医药、农业和畜牧业.为提升5-氨基乙酰丙酸合成效率,该研究以谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum ATCC13032为出发菌株,首先敲除L-谷氨酸输出蛋白编码基因NCgl1221阻断其分泌,菌株5-氨基乙酰丙酸产量达到0.62 g/L.然后利用脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)脚手架体系组装关键酶谷氨酰-tRNA还原酶和谷氨酸-1-半醛氨基转移酶,当二者比例为2:1时最有利于5-氨基乙酰丙酸的合成,产量为0.84 g/L;为增强三羧酸(tricarboxylic acid,TCA)循环,分别通过过表达pyc、ppc和pckA强化回补途径,结合过表达gltA强化柠檬酸合成,结果表明以共表达pckA和gltA的效果最佳;在此基础上通过敲除aceA并过表达pntAB以增强α-酮戊二酸和NADPH供应,所获菌株ALA-10的5-氨基乙酰丙酸产量为1.47 g/L.该研究可为提升5-氨基乙酰丙酸的发酵合成效率提供参考.
谷氨酸棒杆菌、5-氨基乙酰丙酸、DNA脚手架、回补途径、NADPH
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TQ920.1;Q782;Q93
国家自然科学基金;国家重点研发计划;大学生创新创业计划项目;大学生创新创业计划项目
2022-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
9-15
