10.13995/j.cnki.11-1802/ts.016248
合成洋茉莉醛重组菌株的构建与产物鉴定
将一种源于假单胞菌的目的基因克隆到表达载体pET-22b(+),构建重组质粒pET-22b(+)-tao,并转入到大肠杆菌E.coli BL21 (DE3)中进行诱导表达.获得的E.coli BL21(DE3)(tao)于37℃培养70 ~ 90 min后,加入终浓度为0.4 mmol/L的异丙荃硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG),20 ℃诱导6h,黄素单加氧酶(trans-anethole oxygenase,TAO)酶活可达35 U/g.在pH值为8、反应温度为30 ℃的条件下,重组菌全细胞转化黄樟油素生成洋茉莉醛的质量浓度可达9.15 g/L.反应液经乙酸乙酯萃取、浓缩及干燥处理后得到产物晶体,红外色谱以及核磁共振分析证实其为洋茉莉醛,高效液相色谱测定其纯度为97%以上.
洋茉莉醛、重组表达、提取与鉴定、氧化酶、假单胞菌
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国家自然科学基金21604032;“十二五”农村领域国家科技计划课题2015BAD15B04;中央高校基本科研业务费专项资金资助JUSRP116031;江南大学工业生物技术教育部重点实验室开放课题KLIB-KF201501
2018-08-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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