酶标仪法测定γ-氨基丁酸
通过诱变所获得的乳酸菌突变株较多,经96孔板发酵后用传统的分光光度计法测定γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的含量效率低、成本高.为快速、高效地测定GABA的含量,基于Berthelot反应,该实验采用酶标仪法测定GABA含量并对影响该方法的主要因素进行优化.确定了在测定GABA的适宜反应体系中0.2 mol/L pH10.0硼酸盐缓冲液为0.75 mL,6％的重蒸苯酚为2.5 mL,有效氯5.2％的NaClO溶液为2 mL时,酶标仪测定可获得较高的GABA含量,同时进行了精密度试验.最后,通过对诱变后的75株突变株经96孔板发酵后,分别使用分光光度计与酶标仪测定发酵液中GABA的含量并进行拟合,以验证该方法的可行性.得出2种方法的相关系数R=0.949 3,显示2种测定方法具有很好的一致性.该实验结果表明酶标仪法能简便、快速、准确地测定发酵液中GABA的含量,为后续高通量选育GABA乳酸菌奠定了基础.
γ-氨基丁酸、测定、分光光度计、酶标仪、优化
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2014-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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