基于DNA染料EMA的PCR技术检测鉴别副溶血性弧菌死活细胞
将一种DNA染料(ethidium bromide monoazide,EMA)与传统的PCR技术相结合,建立了一种能有效检测纯培养条件下副溶血弧菌死活菌细胞的新方法(EMA-PCR).研究结果表明,当用1.4 μg/mL或更高浓度的EMA渗透处理含有108 CFU/mL的副溶血弧菌死细胞菌悬液后再经20 min曝光处理,其PCR结果呈阴性,而不经EMA处理的对照组其PCR结果则呈阳性;当EMA的用量等于或者小于2 μg/,mL时,副溶血弧菌活细胞的PCR扩增不会受到抑制.经EMA处理,含有不同比例的副溶血弧菌死细胞和活细胞的混合液中活的副溶血弧菌能够通过PCR被选择性的定量,最小的检测水平为10 CFU/PCR.而且,经研究发现在(10～2×105)CFU/PCR范围内,DNA相对荧光强度与死活细胞混合液中活细胞的对数具有线性关系.
ethidium bromide monoazide、聚合酶链反应、副溶血弧菌、死活细胞
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TS2(食品工业)
教育部留学回国人员科研启动基金;辽宁省科技厅项目;沈阳市科技局项目
2010-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
144-149
