环丙沙星单克隆抗体的制备及鉴定
通过改进的碳二亚胺法制备环丙沙星-牛血清白蛋白偶联物(CIP-BSA),用紫外扫描、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法鉴定偶联物.利用制备的CIP-BSA偶联物作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备环内沙星单克隆抗体,并对其效价、亲和力和特异性进行鉴定.结果表明:CIP-BSA的偶联比为30:1.经间接酶联免疫吸附(ELISA)法筛选,共筛出两株敏感、特异的杂交瘤细胞(JY-1、JY-2).这两株细胞的腹水经纯化后的抗体效价分别为5.12×106、2.56×106,亲和力常数分别为2.88×109、2.46×109L/mol,两抗体均为IgG1a,取亲和力高的JY-1进行竞争抑制测定,IC50值可以达到9.83ng/mL.该单抗仅与恩诺沙星存在交叉反应,交叉反应率为95%.通过验证得到的JY-1细胞株分泌的单克隆抗体可用于水产品中环丙沙星残留的快速检测.
环丙沙星、半抗原、抗体、免疫
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R446.61(诊断学)
国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目;"十一五"国家科技支撑计划项目2006BAD03B04;上海市科技兴农重点攻关项目6660106477;上海市重点学科建设项目Y1101
2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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