10.3969/j.issn.1000-2561.2020.09.004
剑麻酵母双杂交cDNA表达文库的构建及与AhKNOX2相互作用蛋白的筛选
植物KNOX(Knotted1-like homeobox)可通过蛋白质相互作用参与调控落果、纤维细胞发育、次生细胞壁发育、开花等事件.为筛选剑麻叶中与AhKNOX2相互作用的蛋白,采用SMART同源重组技术构建剑麻叶片酵母双杂交表达文库,利用AhKNOX2为诱饵筛选与之相互作用的蛋白.结果 表明:文库总容量为3.9×106 CFU,转化效率为9.15×105 CFU/μg pGADT7-Rec,插入片段大小主要分布于0.5～3.0 kb之间,重组率为92％,保存的文库细胞密度为1.35×108/mL,文库滴度为2.22×107 CFU/mL.构建的pGBKT7-AhKNOX2诱饵载体存在自激活性,5 mmol/L的3-氨基-1,2,4-三唑(3-Amino-1,2,4-triazole,3-AT)能抑制诱饵载体的自激活,通过筛选获得了16个与AhKNOX2相互作用的蛋白.本研究成功构建剑麻叶片酵母表达文库,并筛选获得与AhKNOX2相互作用的蛋白,该结果为进一步研究AhKNOX2在剑麻中的功能奠定前期基础,为培育高纤维产量的剑麻新品种提供基因资源和理论基础.
剑麻、AhKNOX2、酵母双杂交、cDNA文库、蛋白质相互作用
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S563.8;Q78(经济作物)
现代农业产业技术体系建设专项资金项目;国家自然科学基金青年基金项目;中国热带农业科学院基本科研业务费专项资金项目
2020-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
1748-1755
