10.3969/j.issn.1000-2561.2016.01.020
木薯MeNRT2.1基因的克隆及表达分析
木薯具有产量高、抗贫瘠等特点,为了了解其耐贫瘠的作用机理,提高木薯在贫瘠土壤中对氮素的利用率,以培养20 d的“华南5号”木薯组培苗为实验材料,采用同源克隆和RT-PCR技术,获得一个高亲和硝态氮转运蛋白(NRT2)基因,命名为MeNRT2.1,该基因含有1 593 bp的开放阅读框架,编码530个氨基酸.生物信息学分析结果表明,木薯MeNRT2.1与苜蓿、拟南芥、可可、杨树等物种的NRT2.1同源性高,其中与可可树TcNRT2.1的亲缘关系最近,氨基酸相似性达到90%.实时荧光定量PCR检测结果表明,MeNRT2.1在木薯组培苗的根中表达,并且在NO3-浓度为0.2 mmol/L时,其相对表达量较高,NO3-浓度为10 mmol/L时其相对表达量较低,NO3-浓度为0时几乎不表达;MeNRT2.1在茎、叶中也几乎不表达,即该基因具有诱导型组织特异性表达模式.原生质体瞬时表达发现MeNRT2.1定位在细胞膜上.此研究为进一步通过NRT2基因提高木薯的抗逆性奠定了基础.
木薯、硝态氮、NRT2、实时荧光定量PCR、亚细胞定位
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S533(薯类作物)
国际科技合作与交流项目2013DFA32020;海南省重大科技项目子课题热带生物种质与基因资源研究ZDZX2013023-1;国家高技术研究发展计划重点项目2012AA101204
2016-05-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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