10.3969/j.issn.1000-2561.2013.06.002
根癌农杆菌介导柱花草炭疽菌遗传转化体系的优化
选取含有氯嘧磺隆抗性标记的ILV1基因和报告基因GFP二元载体的农杆菌AGL-1,采用单因子和双因子方法研究根癌农杆菌AGL-1介导柱花草炭疽菌CH008转化过程中各主要因素对转化率的影响,优化构建ATMT转化柱花草胶孢炭疽菌体系条件,使转化效率达到300 ～400个转化子/106个炭疽孢子,即根癌农杆菌AGL-1浓度OD600=0.8,炭疽菌分生孢子浓度为1x106个/mL,AS浓度为100 μmol/L,诱导时间为6h,共培养温度和时间分别为25 ℃和4d.经PCR检测都有GFP片段,并能够表达绿色荧光蛋白.这为进一步开展炭疽菌对柱花草的致病机理研究提供了依据,优化转化体系有利于后续突变体库的扩大、筛选突变体和致病功能基因的研究.
柱花草、炭疽菌、遗传转化
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Q939.96(微生物学)
国家自然科学基金项目"柱花草炭疽菌致病相关基因的克隆及功能分析"31072076;海南大学211工程建设项目
2013-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1007-1012
