10.3969/j.issn.1000-2561.2010.08.002
香蕉束顶病毒海口分离物Rb蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗血清制备
应用PCR方法从感染香蕉束顶病毒的香蕉植株幼嫩假茎和叶片总DNA中克隆了R6(Rb-binding-likeprotein)基因的编码区,将其插入原核表达载体pET-28b中构建重组质粒pET28b-Rb.转化重组质粒的E.coliBL21(DE3)进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析结果表明,表达产物大小为22.6 ku,且主要以包涵体形式稳定表达.目的蛋白经Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化后免疫家兔并获得抗血清.Western blot检测结果表明,抗血清与诱导表达的BBTV编码Rb蛋白发生特异性反应.间接ELISA法测定的抗血清效价大于1:250 000.用抗血清对感病香蕉和健康香蕉进行检测,结果表明,抗血清对感病香蕉有很高特异性,最佳工作浓度为1:1 500.
香蕉束顶病毒、Rb蛋白、原核表达、抗血清、间接ELISA
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S432.4(病虫害及其防治)
国家科技支撑计划项目2007BAD48B01;教育部,海南省教育厅联合资助博士点基金项目20050565002
2011-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
1239-1243
