10.3969/j.issn.1000-2561.2009.11.007
狗牙根ISSR-PCR反应体系的优化
利用正交设计试验,对影响ISSR-PCR的Mg~(2+)、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶和模板DNA 5个因素进行优化试验.结果表明:25μL ISSR-PCR反应体系中各因素的最佳条件为Mg~(2+)2.5 mmol/L、dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.2μmol/L、Taq DNA聚合酶1.0 U,模板DNA 40 ng.通过对狗牙根ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,得到引物UBC881的最佳退火温度为50.5℃.该体系在24个狗牙根种质中获得较好的扩增结果,该优化体系为今后利用ISSR技术进行狗牙根属种质资源的遗传多样性分析奠定了技术基础.
狗牙根、ISSR-PCR、分子标记、正交设计、体系优化
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S543.9(饲料作物、牧草)
热带牧草种质资源保护项目、国家科技支撑计划No.2008BADB3B08项目、973项目2007CB108903;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所研究生基金项目YJS-2008-B002
2010-03-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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