10.3969/j.issn.1000-2561.2009.09.023
香蕉束顶病毒海口分离物NSP基因的原核表达
应用PCR方法从感染香蕉束顶病毒的香蕉植株幼嫩假茎和叶片总DNA中克隆NSP (Nuclear shuttle protein)基因的编码区,并通过Gateway技术定向重组到原核表达载体pDEST~(TM)-17中的6xHis标签下游,经菌落PCR和测序鉴定结果表明,成功构建了原核表达载体pDEST~(TM)-17-NSP.阳性克隆转化Ecoli BL21(DE3),经IFFG诱导表达、SDS-PAGE分析和western blot检测,结果显示,融合蛋白以包涵体的形式稳定表达,分子量约为20 ku,与预计值相符.通过诱导条件的优化,确定了最佳的融合蛋白表达条件为25℃、0.1 mmol/L IPTG条件下诱导4h.从而为制备NSP多克隆抗体和进一步研究NSP的功能奠定了基础.
香蕉束顶病毒、Gateway重组技术、NSP、原核表达
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S668.1;S432.41;Q785(果树园艺)
国家科技支撑计划项目2007BAD48801;教育部/海南省教育厅联合资助博士点基金项目20050565002
2010-01-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1345-1350
