10.12160/j.issn.1672-5190.2022.05.001
绵羊梅迪-维斯纳病毒CA蛋白可溶性表达、多克隆抗体制备及鉴定
[目的]制备绵羊梅迪-维斯纳病毒(maedi-visna virus,MVV)衣壳蛋白(capsid protein,CA)多克隆抗体,并鉴定其特异性.[方法]根据MVV内蒙古分离株CA基因序列设计特异性引物,扩增CA基因,构建重组质粒;对CA重组蛋白进行原核表达及纯化,制备兔源MVV CA重组蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA方法测定其抗体效价,利用Western blot和免疫组化方法对其进行特异性鉴定.[结果]成功构建MVV CA重组蛋白原核表达系统,纯化后的目的蛋白大小约27 kDa;间接ELISA方法测定制备的多克隆抗体效价为1:8192;Western blot检测感染MVV绵羊的病肺组织,在25 kDa处出现特异性条带;免疫组化结果显示感染MVV绵羊的病肺中巨噬细胞的胞浆内有明显棕黄色阳性信号.[结论]利用获得的可溶性重组MVV CA蛋白制备的多克隆抗体具有较好特异性,可为MVV血清学诊断技术提供检测抗体.
绵羊、梅迪-维斯纳病毒、衣壳蛋白、原核表达、多克隆抗体
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S852.654;Q785(动物医学（兽医学）)
国家自然科学基金;内蒙古科技重大专项计划项目;内蒙古应用研究项目;内蒙古草原英才创新团队项目
2022-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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